人白介素ELISA试剂盒使用时需要注意哪些要点？

　　人白介素ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素水平。用纯化的人白介素抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素，再和HRP标记的白介素抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。
 

　　人白介素ELISA试剂盒使用时需要注意的要点：
 

　　1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
 

　　2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
 

　　3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间较好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
 

　　4.请每次测定的同时做标准曲线，较好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请较后乘以总稀释倍数(×n×5)。
 

　　5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
 

　　6.底物请避光保存。
 

　　7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
 

　　8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
 

　　9.本试剂不同批号组分不得混用。
 

　　10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
 

　　人白介素ELISA试剂盒的计算：
 

　　以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
 

　　试剂盒性能:
 

　　1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
 

　　2.批内与批见应分别小于9%和11%